

微生物質(zhì)譜鑒定是一基于細(xì)菌全細(xì)胞蛋白質(zhì)組指紋圖譜分析的技術(shù),需要通過專門的數(shù)據(jù)分析和專家系統(tǒng)對(duì)未知細(xì)菌的特殊蛋白圖譜和菌種文庫中收集的菌種蛋白質(zhì)組指紋圖譜進(jìn)行比較。由于微生物質(zhì)譜分析的蛋白質(zhì)大分子適合于飛行時(shí)間質(zhì)量分析器,因此,微生物的質(zhì)譜鑒定被統(tǒng)稱為基質(zhì)輔助激光解吸電離的飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)MALDI-TOF MS。
質(zhì)譜分析儀與傳統(tǒng)鑒定卡比較優(yōu)點(diǎn)主要如下:
1.快速: MALDI-TOF MS.能直接對(duì)微生物的蛋白質(zhì)混合物進(jìn)行分析.標(biāo)本接種24小時(shí)后,只要長出單個(gè)菌落,如圖1,即可鑒定分析,從上機(jī)到出報(bào)告不足30分鐘。傳統(tǒng)鑒定卡法需挑取圖1單個(gè)菌落轉(zhuǎn)種分純,24小時(shí)后生長為圖2純菌狀態(tài)再上機(jī)鑒定,然后等待16-24小時(shí)出鑒定結(jié)果。與傳統(tǒng)鑒定卡法相比,質(zhì)譜分析儀將細(xì)菌鑒定時(shí)間提前了48小時(shí)。
圖1初次培養(yǎng) 圖2 純培養(yǎng)
2.具有適應(yīng)范圍廣,準(zhǔn)確,靈敏。一些特殊細(xì)菌如諾卡,埃肯菌等鑒定卡無法檢測(cè)的細(xì)菌都可以鑒定。
3.高通量,每張卡有48個(gè)孔位,一次最多可以檢測(cè)48份標(biāo)本。
質(zhì)譜分析儀與傳統(tǒng)鑒定卡比較缺點(diǎn)主要如下:
1.使用成本高:質(zhì)譜分析儀設(shè)備價(jià)格和運(yùn)營維護(hù)費(fèi)用較高。
2.對(duì)操作者技術(shù)要求高:操作者需要專門的培訓(xùn)和練習(xí)才能正確操作和分析數(shù)據(jù)
3.清洗和校準(zhǔn)復(fù)雜。
注意事項(xiàng)
1.質(zhì)控菌種最好是第三代菌種,并需要每天轉(zhuǎn)種。
2.質(zhì)控位置上必須涂抹質(zhì)控菌種。
3.卡板孔位上涂抹細(xì)菌時(shí)厚薄要適當(dāng)。
4.只能做細(xì)菌鑒定,不能做藥敏實(shí)驗(yàn)。